Determinación de la concentración mínima inhibitoria de lotes de OLEOZON® tópico frente a Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes y Epidermophyton floccosum

Introducción: En la actualidad las infecciones por hongos afectan entre el 20 y el 25 % de la población. Objetivo: Determinar la concentración mínima inhibitoria de dos lotes de OLEOZON® almacenados a temperaturas de 5 y 30°C en envases de vidrio y polietileno de alta densidad, durante 24 meses como parte del estudio de estabilidad del OLEOZON® tópico. Métodos: Mediante el método dilución en agar fueron evaluadas cinco concentraciones del producto frente a los dermatofitos trichophyton rubrum, trichophyton mentagrophytes y epidermophyton floccosum. Resultados: Se obtuvo que el 8,9 mg/mL fue el valor de la CMI para las cepas evaluadas en el estudio "vida de estante"; se observó en el estudio acelerado el mismo valor frente a las cepas de trichophyton mientras que para epidermophyton floccosum fue de 17,8 mg/mL a excepción del envase frasco de vidrio del lote 803295 donde se obtuvo 8,9 mg/mL. El análisis estadístico, tanto del estudio acelerado como en vida de estante, mostró que existe diferencia estadísticamente significativa entre el primer y el último mes de ensayo, estas son las diferencias más apreciables en los lotes almacenados en frasco de vidrio. El OLEOZON® tópico almacenado en frasco de polietileno de alta densidad presentó mejores valores de actividad frente a los dermatofitos. Conclusiones: Todos los valores de la concentración mínima inhibitoria encontrados, independiente del tipo de envase, el tiempo o la temperatura de almacenamiento, muestran que el producto mantiene su actividad antifúngica. Se evidenció una similitud entre las cepas del género trichophyton en comparación con el género epidermophyton.

Introduction: Currently fungal infections affect between 20 and 25% of the population. Objective: To determine the minimum inhibitory concentration of two batches of OLEOZON® stored at temperatures of 5 and 30 0C in glass and high-density polyethylene containers, for 24 months as part of the stability study of topical OLEOZON®. Methods: Using the agar dilution method, five concentrations of the product were evaluated against the dermatophytes Trichophyton rubrum, Trichophyton mentagrophytes and Epidermophyton floccosum. Results: It was found that 8.9 mg/mL was the MIC value for the strains evaluated in this shelf life study; and the same value was observed in the accelerated study against the trichophyton strains, while for epidermophyton floccosum it was 17.8 mg/mL with the exception of the glass bottle container of batch 803295 where 8.9 mg/mL was obtained. The statistical analysis, both in the accelerated study and in shelf life, showed that there is a statistically significant difference between the first and the last month of the trial, these are the most appreciable differences in the batches stored in glass jars. Topical OLEOZON® stored in a high-density polyethylene bottle presented better activity values against dermatophytes. Conclusions: All the values of the minimum inhibitory concentration found, regardless of the type of container, the time or the storage temperature, show that the product maintains its antifungal activity during the months of study. A similarity was apparent between the strains of the genus trichophyton compared to the genus epidermophyton.

Actividad antibacterial de nanopartículas de óxido de zinc sobre Listeria monocytogenes ATCC 7644 / Antibacterial activity of zinc oxide nanoparticles against Listeria monocytogenes ATCC 7644

Introducción: Las nanopartículas de óxido de zinc (Np-ZnO) presentan diferentes comportamientos; permitiendo su aplicación en diversas áreas. Objetivos: Determinar cuál es la concentración mínima inhibitoria de nanopartículas de óxido de zinc sobre el crecimiento de Listeria monocytogenes ATCC 7644. El estudio: Se utilizaron nanopartículas de ZnO con un tamaño promedio de 90 nm, a diferentes concentraciones de 4; 2; 1; 0,5; 0,25; 0,12; 0,06; 0,03; 0,01; 0,007 mg/mL de Np-ZnO, preparadas en solución acuosa. Se incubó en un tiempo correspondiente al de generación de la bacteria, evaluando el crecimiento con la aparición de turbidez. Hallazgos: Listeria monocytogenes ATCC 7644 presentó una CMI de 0,06 mg/mL. Conclusión: La concentración mínima inhibitoria (CMI) resultante para las nanopartículas de óxido de zinc (Np-ZnO) de 90 nm de tamaño promedio fue de 0,06 mg/mL, suficiente para controlar significativamente el crecimiento contra Listeria monocytogenes ATCC 7644.

background:Zinc oxide nanoparticles (Np-ZnO) have different behaviors which allows its application in various areas. : To determine the Objectivesminimum inhibitory concentration (MIC) of Zinc oxide nanoparticles for Listeria monocytogenes ATCC 7644. Zinc oxide nanoparticles with an The study:average size of 90nm and different concentrations of 4; 2; 1; 0,5; 0,25; 0,12; 0,06; 0,03; 0,01; 0,007 mg/mLprepared in aqueous solution were used. It was incubated at a time corresponding to generation time of the bacteria, evaluating the growth with the presence of turbidity. : The MIC for FindingsListeriamonocytogenesATCC7644was0,06mg/mL.The Conclusion:minimum inhibitory concentration (MIC) of Zinc oxide nanoparticles (Np-ZnO) with an average size of 90nm for Listeria monocytogenes ATCC 7644 was 0,06 mg/mL, enough value to significantly control the growth of for Listeria monocytogenes ATCC 7644.

In vitro antimicrobial activity of Caesalpinia coriaria (Jacq. ) Willd extracts on Streptococcus pyogenes and Candida albicans / Actividad antimicrobiana in vitro de extractos de Caesalpinia coriaria (Jacq. ) Willd sobre Streptococcus pyogenes y Candida albicans

Background: "Dividivi" Caesalpinia coriaria (Jacq.) Willd fruits are traditionally used by the Wayuú community in La Guajira (Colombia) to treat oral and skin cavity diseases caused by bacteria and fungi. Streptococcus pyogenes is a gram-positive cocci of group A (beta-hemolytic) that is the cause of pharyngeal disease, scarlet fever, cellulitis, erysipelas, or toxic shock-like syndrome. Alternatively, Candida albicans is a yeast-like fungus that is a normal flora of the digestive tract, vagina, or skin folds; it has been known to be the root cause of opportunistic diseases such as diaper rash, oral and esophagus thrush, or vulvovaginitis. Objective: This study evaluated the antimicrobial activity of methanolic and ethanolic extracts of C. coriaria (Jacq.) Willddry fruits on S. pyogenes ATCC 12384andC. albicans ATTC 14053. Method: C. coriaria extracts were obtained from the Soxhlet method using two solvents (methanol and ethanol 98%) prepared from pulverized fruits. A phytochemical test and an antimicrobial activity assay were performed using the obtained extracts and tested using S. pyogenes ATCC 12384 and C. albicans ATTC 14053 strains. Results: A phytochemical profile was performed, examining the presence of bioactive metabolites (tannins, alkaloids, glycosides, saponins, and anthraquinones) from each extract. Antimicrobial susceptibility tests showed that the ethanolic extract inhibited S. pyogenes ATCC 12384,causing inhibition halos of 14.1 ± 0.1 mm and a Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of 172 mg/ml, and C. albicans test shows inhibition halos of 16.1 ± 0.2 mm and MIC of 212 mg/ml. Additionally, the methanolic extract inhibited S. pyogenes with inhibition halos of 15.2 ± 0.2 mm and MIC of 152 mg/ml; no inhibitory effect was observed on C. albicans.Conclusion: This study revealed that C. coriaria has an antimicrobial effect on the tested species opening the field of its possible use as a therapeutic agent

Introducción: Los frutos del "Dividivi" Caesalpinia coriaria (Jacq.) Willd son usados tradicionalmente por la comunidad indígena Wayuú en La Guajira (Colombia) para el tratamiento de enfermedades de la cavidad bucal y cutáneas ocasionadas por bacterias y hongos. Streptococcuspyogenes es un coco grampositivo del grupo A (beta-hemolítico) que es la causa de enfermedad faríngea, escarlatina, celulitis, erisipela o síndrome tipo shock tóxico. Candida albicans es un hongo levaduriforme que es flora normal del tracto digestivo, la vagina o los pliegues de la piel; se sabe que es la causa principal de enfermedades oportunistas como la dermatitis del pañal, aftas bucales y esofágicas, o vulvovaginitis. Objetivo: El objetivo de este estudio fue evaluar la actividad antimicrobiana de extractos metanólicos y etanólicos de frutos secos sobre microorganismos patógenos específicamente S. pyogenes ATCC 12384yC. albicansATTC 14053. Método: A partir de frutos polverizados de C. coriaria, usando el método Soxlet, se evaluaron dos solventes (metanol y etanol al 98%), los cuales, fueron usados para estudiar su actividad antimicrobiana evaluando su efecto en cepas de S. pyogenes ATCC 12384 y C. albicans ATTC 14053. Resultados: Mediante un perfil fitoquímico se determinó la presencia de grupos de metabolitos secundarios con compuestos bioactivos (taninos, alcaloides, glucósidos, saponinas, y antraquinonas). Las pruebas de sensibilidad antimicrobiana mostraron que el extracto etanólico tuvo un efecto inhibidor sobre S. pyogenesATCC 12384 con halos de inhibición de 14.1 ± 0.1 mm y una concentración mínima inhibitoria (CMI) de 172 mg/mL, y sobre C. albicans se presentaron halos de inhibición de 16.1 ± 0.2 mm y CMI de 212 mg/mL, mientras que el extracto metanólico tuvo un efecto inhibidor sobre S. pyogenes con halos de inhibición de 15.2 ± 0.2 mm y CMI de 152 mg/mL no se observó efecto inhibidor sobre C. albicans. Conclusión: Este estudio demostró que C. coriaria tiene efecto antimicrobiano en las especies evaluadas, abriendo un campo de investigación en la evaluación de su uso como agente terapéutico

Efecto Inhibitorio de fracciones polifenolicas de la semilla de Persea americana var. Hass sobre el crecimiento de Helicobacter pylori / Inhibitory effect of seed polyphenolic fractions of Persea americana var. Hass on the Helicobacter pylori growth

ntroducción: El cáncer gástrico (CG) es la principal causa de muerte por cáncer en Colombia y de etiología multifactorial, asociada a factores genéticos del huésped, factores ambientales y el oncopatogeno Helicobacter pylori (H. pylori) como el principal factor de riesgo de la enfermedad. El aguacate (Persea americana var. Hass, (P. americana)) posee un alto contenido de polifenoles, con actividad bactericida, antioxidante, anti-ureasa, y antinflamatoria, que a su vez limitan los cambios en el ambiente gástrico que favorecen la colonización de la bacteria y posterior desencadenamiento de la cascada precancerosa. Objetivo: Evaluar la concentración mínima inhibitoria de fracciones polifenolicas de la semilla de P. americana sobre el crecimiento in vitro de H pylori. Resultados: La evaluación de la concentración mínima inhibitoria (CMI) de las tres fracciones obtenidas de la semilla de P. americana en cultivo de H. pylori in vitro, mostró que las fracciones uno y dos inhibieron el crecimiento bacteriano a 3000 ppm, mientras que la fracción 3 a 1500 ppm, P< 0,05. Conclusión: Se encontraron tres biofracciones polifenolicas de la semilla P. americana, principalmente constituidas por procianidinas, con actividad antibacterial in vitro de Helicobacter pylori, sin embargo, la fracción tres, de mayor peso molecular, inhibió el crecimiento de manera significativa a una CMI de 1500 ppm, comparada con las fracciones uno y dos.

Introduction: Gastric cancer (GC) is the main cause of cancer death in Colombia and of multifactorial etiology, associated with genetic factors of the host, environmental factors and the oncopathogen Helicobacter pylori (H. pylori) as the main risk factor of the disease. The avocado (Persea americana var. Hass, (P. americana)) has a high content of polyphenols, with bactericidal, antioxidant, anti-urease, and anti-inflammatory activity, which in turn limit changes in the gastric environment that favor colonization bacteria and subsequent triggering of the precancerous cascade. Objective: To evaluate the minimum inhibitory concentration of polyphenolic fractions of P. americana seed on the in vitro growth of H pylori. Results: The evaluation of the minimum inhibitory concentration (MIC) of the three fractions obtained from the P. americana seed in H. pylori culture in vitro, showed that fractions one and two inhibited bacterial growth at 3000 ppm, while fraction 3 at 1500 ppm, P <0.05. Conclusion: Three polyphenolic biofractions of the P. americana seed were found, mainly constituted by procyanidins, with in vitro antibacterial activity of Helicobacter pylori, however, fraction three, with a higher molecular weight, significantly inhibited growth at a MIC of 1500 ppm, compared to fractions one and two.

Comparación de dos métodos comerciales para la determinación de la concentración mínima inhibitoria de meropenem en Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasa tipo KPC / Comparison of two commercial methods for determination of the minimum inhibitory meropenem concentration in KPC carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae

Introducción: El tratamiento de las infecciones por Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasa tipo KPC es complicado debido a las escasas opciones terapéuticas existentes, lo cual obliga a optimizar los esquemas terapéuticos disponibles. Objetivo: Determinar la concordancia de la tarjeta AST-N272 del Sistema Vitek 2 Compact y las tiras M.I.C.ETM Evaluator con la dilución en agar para la determinación de la concentración mínima inhibitoria del meropenem en Klebsiella pneumoniae productora de carbapenemasa tipo KPC. Métodos: Se estudiaron 53 aislados de K. pneumoniae bla KPC positivas no clonales, provenientes de hisopados rectales recolectados en diferentes unidades hospitalarias de Guayaquil, Ecuador, entre enero a junio de 2016. Se determinó la concentración mínima inhibitoria de meropenem por dilución en agar (método de referencia), así como por el sistema Vitek 2 Compact (AST-N272) y las tiras M.I.C.ETM. Se determinó la CMI 50, CMI 90 y la concordancia esencial. Resultados: El rango de la CMI de meropenem de los aislados estudiados fue de 1 a ≥ 32 µg/mL, con una CMI50= 4 µg/mL y una CMI90= ≥ 32 µg/mL. El 86,79 por ciento (n= 46) de los aislados tuvo una CMI≤ 8 µg/mL. Se observó un 94,33 por ciento de concordancia esencial con las tiras M.I.C.ETM, mientras que la tarjeta AST-N272 mostró una concordancia esencial inferior al 50 por ciento. Conclusiones: Los resultados sugieren posibles implicaciones en el tratataminto del paciente, pues reduce opciones terapéuticas en contextos de difícil manejo. Además, resaltan la necesidad de la confirmación de la resistencia a carbapenémicos mediante el método de Kirby Bawer en aquellos laboratorios que tienen métodos automatizados para estudios de susceptibilidad(AU)

Introduction: The treatment for KPC carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae infections is complicated, due to the scant therapeutic options available, which forces us to optimize the therapies at hand. Objective: Determine the agreement between the AST-N272 card of the Vitek 2 Compact system and the M.I.C.E.TM Evaluator strips, and the agar dilution method for determination of the minimum inhibitory meropenem concentration in KPC carbapenemase-producing Klebsiella pneumoniae. Methods: A study was conducted of 53 positive non-clonal K. pneumoniae bla KPC isolates from rectal swabs collected at several hospitals in Guayaquil, Ecuador, from January to June 2016. Minimum inhibitory meropenem concentration was determined by agar dilution (reference method), the Vitek 2 Compact system (AST-N272) and M.I.C.E.TM strips. Determination was made of MIC 50, MIC 90 and essential agreement. Results: The meropenem MIC range for the isolates studied was 1 to ≥ 32 µg/ml, with MIC50= 4 µg/ml and MIC90= ≥ 32 µg/ml. In 86.79 percent (n= 46) of the isolates MIC was ≤ 8 µg/ml. Essential agreement was 94.33 percent with the M.I.C.E.TM strips and under 50 percent with the AST-N272 card. Conclusions: The results obtained suggest potential implications for the treatment of patients, since therapeutic options are reduced in difficult management contexts. They also highlight the need for confirmation of carbapenem resistance by the Kirby-Bauer procedure in laboratories equipped with automated methods for susceptibility studies(AU)

Actividad antifúngica del aceite volátil de Hedyosmum sp, frente a especies del género Candida / Antifungal activity of the volatile oil of Hedyosmum sp, Against species of the genus Candida

El objetivo del estudio fue determinar la actividad antifúngica del aceite volátil de las partes aéreas de la especie vegetal Hedyosmum sp., frente al complejo Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis y C. parapsilosis. El material vegetal se recolectó del bosque natural Jacarón, Provincia de Chimborazo, Ecuador. La extracción del aceite volátil se realizó por hidrodestilación, obteniéndose un rendimiento de 0,09%. La actividad antifúngica fue estudiada mediante el método de difusión en agar y los resultados se interpretaron mediante detección-medición de halos de inhibición y concentración mínima inhibitoria. El estudio se realizó partiendo del aceite puro y diluciones con dimetil sulfóxido. Los resultados se validaron mediante controles positivos (Fluconazol) y negativos (dimetil sulfóxido). El aceite puro mostró actividad antifúngica frente a C. albicans, C. tropicalis, C. parapsilosis, pero no frente a C. glabrata. Mientras que, la actividad antifúngica determinada empleando diluciones del aceite permitió establecer la concentración mínima inhibitoria para C. tropicalis, C. parapsilosis, en 0,25x106 µg/mL y para C. albicans en 0,5x106 µg/mL. Estos resultados concluyeron que el aceite volátil de Hedyosmum sp., presenta actividad antifúngica poco significativa frente a tres de las cuatro especies de Candida estudiadas

The objective of the study was to determine the antifungal activity of the volatile oil of the aerial parts of the plant species Hedyosmum sp., against Candida albicans, C. glabrata, C. tropicalis and C. parapsilosis complex. The plant material was collected from the Jacarón natural forest, Chimborazo Province, Ecuador. The extraction of the essential oil was carried out by hydro-distillation, obtaining a yield of 0.09%. Antifungal activity was studied by means of the diffusion in agar method and the results were interpreted by detection-measurement of inhibition halos and minimum inhibitory concentration. The study was carried out starting from the pure oil and dilutions with dimethyl sulfoxide. The results were validated by positive controls (Fluconazole) and negative controls (dimethyl sulfoxide). The pure oil showed antifungal activity against C. albicans, C. tropicalis, and C. parapsilosis complex, but not against C. glabrata. While, the antifungal activity determined using dilutions of the oil allowed establishing the minimum inhibitory concentration for C. tropicalis, C. parapsilosis complex, at 0,25x106 µg/mL and for C. albicans at 0,5x106 µg/mL. These results concluded that the volatile oil of Hedyosmum sp., Presents little antifungal activity against three of the four Candida species studied

Comparación y evaluación de métodos cuantitativos para determinar la susceptibilidad antimicrobiana de cepas del complejo Mycobacterium abscessus / Comparison and Evaluation of Quantitative Methods for Determining Antimicrobial Susceptibility of Complex Mycobacterium Abscessus Strains / Comparação e avaliação de métodos quantitativos para determinar a susceptibilidade antimicrobiana de cepas do complexo Mycobacterium abscessos

Resumen Introducción: el complejo Mycobacterium abscessus incluye especies patógenas emergentes multirresistentes, lo cual limita las opciones terapéuticas para tratar las infecciones causadas por dichos microorganismos. En este estudio se compararon las concentraciones inhibitorias mínimas (CIM) obtenidas mediante dos métodos cuantitativos, se establecieron los puntos de corte empleados en el micrométodo colorimétrico (MMC) y se evaluó la susceptibilidad antimicrobiana. Materiales y métodos: la CIM de nueve antibióticos fue determinada mediante el MMC y la microdilución en caldo (MDC) para 19 cepas del complejo M. abscessus. El test F de Snedecor se utilizó para establecer la diferencia significativa de las CIM entre los dos métodos y se determinaron los puntos de corte mediante la técnica de distribución de la probabilidad para el MMC. Resultados: se encontró una correlación de los resultados de la CIM del 50% entre MMC y MDC para los antibióticos ensayados. Probablemente esta discrepancia en los resultados se deba a diferencias en algunos parámetros técnicos de cada procedimiento. Todas las cepas fueron sensibles a la amikacina y resistentes a meropenem y ampicilina-sulbactam. Independientemente de la especie del complejo M. abscessus, las fluoroquinolonas mostraron una baja actividad inhibitoria (0-25%) sobre los aislados clínicos, resultados que son similares a los reportados por otros autores. Conclusión: Los patrones de multirresistencia observados en las cepas analizadas sugieren la necesidad de utilizar las pruebas de susceptibilidad como herramientas que permitan orientar y optimizar las conductas terapéuticas en infecciones producidas por M. abscessus.

Abstract Introduction: The Mycobacterium abscessus complex includes multidrug resistant emerging pathogens, which limit therapeutic options for treating infections caused by these microorganisms. In this study, the minimum inhibitory concentrations (MICS) obtained by 2 quantitative methods were compared, the cut-off points used in the colorimetric micromethod (CMM) were established and the antimicrobial susceptibility was evaluated. Materials and Methods: The MIC for nine antibiotics was determined by CMM and broth microdilution (BMD) for 19 strains of M. abscessus complex. The Snedecor F test was used to establish the significant difference in the CIM between the methods, cutoff points were determined by the probability distribution method for the CMM. Discussion: A correlation of 50% between CMM and BMD for antibiotics tested was found. Probably, this discrepancy in the results is due to differences in some technical parameters of each procedure. All strains were susceptible to amikacin and were resistant to meropenem and ampicillin-sulbactam. Independently of the species of M. abscessus complex, fluoroquinolones showed a low inhibitory activity (0-25%) on clinical isolates, results that are similar to those reported by other authors. Conclussion: The Multidrug resistance patterns observed in the strains tested suggest the need for susceptibility testing as tools to guide and optimize the therapeutic behavior in infections caused by M. abscessus.

Resumo Introdução: o complexo Mycobacterium abscessus inclui espécies patógenas emergentes multirresistentes, o qual limita as opções terapêuticas para tratar as infeções causadas por estes microrganismos. Neste estudo compararam-se as concentrações inibitórias mínimas (CIMS) obtidas mediante 2 métodos quantitativos, se estabeleceram os pontos de corte empregados no micrométodo colorimétrico (MMC) e se avaliou a susceptibilidade antimicrobiana. Materiais e métodos: a CIM de 9 antibióticos foi determinada mediante o MMC e microdiluição em caldo (MDC) para 19 cepas do complexo M. abscessus. O teste F de Snedecor utilizou-se para estabelecer a diferença significativa das CIMS entre os dois métodos e determinaram-se os pontos de corte mediante a técnica de distribuição da probabilidade para o MMC. Resultados: se encontrou uma correlação dos resultados da CIM do 50% entre MMC e MDC para os antibióticos testados. Provavelmente, esta discrepância nos resultados se deve a diferenças em alguns parâmetros técnicos de cada procedimento. Todas as cepas foram sensíveis à amikacina e resistentes a meropenem e ampicilina-sulbactam. Independentemente da espécie do complexo M. abscessos, as fluoroquinolonas mostraram uma baixa atividade inibitória (0-25%) sobre os isolados clínicos, resultados que são similares aos reportados por outros autores. Conclussão: Os patrões de multirresistência observados nas cepas analisadas, sugerem a necessidade de utilizar as provas de susceptibilidade como ferramentas que permitam orientar e otimizar as condutas terapêuticas em infeções produzidas por M. abscessus.

Antimicrobial Activity of Cationic Peptides Designed from Neutral Peptide / Actividad antimicrobiana de péptidos catiónicos diseñados a partir de un péptido neutro

RESUMEN Los péptidos antimicrobianos (PAMs) juegan un papel importante en la inmunidad innata de la mayoría de los organismos; ellos pueden tener actividad en bacterias, hongos, virus y parásitos. El mecanismo de acción de los PAMs catiónicos yace en la capacidad de interactuar con membranas microbianas, debido a la superficie aniónica de dichas membranas. La familia de las cecropinas fue identificada como una de las familias peptídicas más importantes en los insectos. Los péptidos de esta familia, no contienen residuos de cisteína y son clasificados como helicoidales. Para estudiar el efecto de la carga sobre la estructura, nosotros introducimos residuos cargados positivamente en los primeros 18 aminoácidos de la región N-terminal de la cecropina-D (WT), y se evaluó la actividad biológica de los péptidos modificados. Dos análogos de la cecropina-D con cargas netas de +5 y +9, fueron obtenidos por síntesis de fase sólida (SSP). Los cambios en los péptidos análogos fueron generados de la siguiente manera: péptido +5 con tres sustituciones (E6R, E8R and Q12K) y péptido +9 con cinco sustituciones (E1R, E6R, E8R, Q12K, and D16K). La actividad antibacteriana fue evaluada en dos grupos de bacterias, con el fin de investigar los efectos de las cargas positivas en dicha actividad. Los péptidos catiónicos mostraron una mayor actividad antimicrobiana tanto en bacterias Gram-negativas como en Gram-positivas, a diferencia del péptido WT. Las representaciones en 3D de los péptidos mostraron que ellos tienen una estructura α-hélice. Nuestros resultados demostraron que cambios en la carga de los péptidos incrementa la actividad antibacteriana.

ABSTRACT Antimicrobial peptides (PAMs) play an important role in the innate defense systems of most organisms; they act against bacteria, fungi, viruses and parasites. The mechanism of action of cationic PAMs rely on their capacity to interact with the anionic microbial membrane surface. The cecropin family was identified as one of the most important peptides in insects. Such peptides do not contain cysteine residues and are classified as α-helical. To study the effect of the charge on the peptide structure, we introduced positive charge residues in the last 18 residues at the N-end of cecropin-D (WT) and evaluated the biological activity of the modified peptides. Two analogous peptides from cecropin-D were obtained by synthesis of a solid phase (SSP) with charges of+5 and +9. The analogous peptides were generated as followed: peptide +5 with three substitutions (E6R, E8R and Q12K) and peptide +9 with five substitutions (E1R, E6R, E8R, Q12K, and D16K). Antibacterial activity was evaluated to investigate the effects of the positive charge in these two analogue peptides against two groups of bacteria. The cationic peptides showed higher antimicrobial activity against Gram-negative and Gram-positive bacteria than the WT peptide. The 3D representations of the peptides showed that they have α-helical structure. Our results demonstrate that changes in the charge of peptides increase the antibacterial activity.

Susceptibilidad antibiótica de Helicobacter pylori: un estudio de prevalencia en pacientes con dispepsia en Quito, Ecuador / Susceptibility of Helicobacter Pylori to Antibiotics: a Study of Prevalence in Patients with Dyspepsia in Quito, Ecuador

Resumen Introducción: el Helicobacter pylori se asocia con patologías gastrointestinales, el incremento en la resistencia a los antibióticos utilizados para su erradicación es alarmante a nivel mundial. En este estudio se determinó la susceptibilidad a 5 antibióticos utilizados en la terapia de erradicación de H. pylori aislado de una población adulta con dispepsia recurrente en Quito, Ecuador. Materiales y métodos : previa aceptación del consentimiento informado, se tomaron biopsias de cuerpo y fondo gástrico de 210 pacientes con dispepsia y mediante cultivo se recuperaron los aislados de H. pylori identificado mediante pruebas bioquímicas. La susceptibilidad al metronidazol, claritromicina, amoxicilina, tetraciclina y levofloxacina se realizó por concentración mínima inhibitoria (CMI). Todos los cultivos se correlacionaron con el estudio histopatológico. Resultados: se recuperaron 89 aislados de H. pylori. Se obtuvo un kappa de 0,9 entre el cultivo y el estudio histopatológico. El porcentaje de cepas con resistencia antibiótica fue: metronidazol (63%), claritromicina (66%), amoxicilina (43%), tetraciclina (36%) y levofloxacina (54%). Conclusión: estos hallazgos demuestran la alta resistencia a los antibióticos usados para la erradicación de H. pylori, varios factores como el consumo indiscriminado de antibióticos, terapia previa, entre otros podrían estar involucrados.

Abstract Introduction: Worldwide, helicobacter pylori is associated with gastrointestinal pathologies, but increasing resistance to antibiotics used for its eradication is causing alarm. This study determined susceptibility of H. pylori to five antibiotics used in eradication therapy in an adult population with recurrent dyspepsia in Quito, Ecuador. Materials and methods: After patients provided informed consent, biopsies were taken from the gastric corpus and fundus of 210 patients with dyspepsia. H. pylori isolates identified by biochemical tests were recovered from cultures of biopsy samples. Minimal inhibitory concentrations (MIC) of metronidazole, clarithromycin, amoxicillin, tetracycline and levofloxacin were tested to indicate susceptibility. All cultures were correlated with the histopathological study. Results: H. pylori isolates were recovered from 89 cultures. A kappa of 0.9 was obtained between the culture and the histopathological study. The percentage of strains with antibiotic resistance were 63% for metronidazole, 66% for clarithromycin, 43% for amoxicillin, 36% for tetracycline and 54% for levofloxacin. Conclusion: These findings demonstrate high levels of resistance to the antibiotics used for eradication of H. pylori. Several factors including indiscriminate consumption of antibiotics and previous therapy may be involved.

Antibacterial effect of crude methanol Carica papaya L. (papaya) extract and amoxicillin combination

Background: the emergence of multi-drug resistant bacteria and the diseases caused by them are a serious threat to global health necessitating an urgent need for new approaches to combat them. Synergy studies of conventional antimicrobial drugs and medicinal plants with antibacterial effects are important to establish whether it is prudent to recommend their concurrent administration to get successful treatments. Objective: evaluate the antibacterial effect resulting from the combination of Carica papaya (papaya) and amoxicillin. Methods: the papaya methanol extract was obtained from seeds and phytochemical screening was done. Checkerboard assay was used to determine the Minimum Inhibitory Concentration. Combined effect of both Carica papaya methanol extract and amoxicillin was determined by calculating the Fractional Inhibitory Concentration index. Strains of Staphylococcus aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 25922 were used in the tests. Results: phenols and tannins were found in the Carica papaya seed methanol extract. The minimum inhibitory concentration of Carica papaya extract was 100 µg/mL for both microorganisms studied which was higher than the Minimum Inhibitory Concentration of amoxicillin being 3.12 µg/mL for Escherichia coli and 0.2 µg/mL for Staphylococcus aureus. The Fractional Inhibitory Concentration of the combination of drugs was 0.99 for Escherichia coli and 2.51 for Staphylococcus aureus. Conclusions: the antibacterial effect of Carica papaya extract may be attributed to the presence of phenolic compounds. There was no interaction between amoxicillin and Carica papaya extract on Staphylococcus aureus, but the antimicrobial activity against Escherichia coli of both drugs can be potentiated by their additive interaction(AU)

Introducción: la creciente multi-resistencia bacteriana y emergencia de enfermedades causadas por estas bacterias, constituyen un serio problema global, por lo que es importante y urgente el desarrollo de nuevas propuestas terapéuticas para combatirlas. Estudios sinérgicos sobre la combinación de antimicrobianos convencionales y plantas con efectos antibacterianos son importantes para determinar si es aconsejable la administración concomitante de los mismos. Objetivo: evaluar el efecto antibacteriano de la combinación de Carica papaya (papaya) y amoxicilina. Método: fueron usadas semillas de papaya para obtener el extracto alcohólico de papaya y realizado el estudio fitoquímico. La Concentración Mínima Inhibitoria fue determinada por el método del tablero de ajedrez. La Concentración Inhibitoria Fraccionada se calculó para medir el posible efecto sinérgico de la combinación entre el extracto alcohólico de Carica papaya y la amoxicilina. Cepas de Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Escherichia coli ATCC 25922 fueron usadas. Resultados: en el extracto alcohólico de papaya fueron encontrados fenoles y taninos. La Concentración Mínima Inhibitoria del extracto de papaya coincidió para ambos microorganismos (100 µg/mL), la cual fue mayor que la Concentración Mínima Inhibitoria de la amoxicilina, siendo 3.125 µg/mL para Escherichia coli y 0.2 µg/mL para Staphylococcus aureus. La Concentración Inhibitoria Fraccionada de la combinación de drogas, fue 0.99 para Escherichia coli y 2.51 para Staphylococcus aureus. Conclusiones: los compuestos fenólicos presentes en el extracto de papaya pueden ser responsables de su efecto antimicrobiano. No existe interacción entre la amoxicilina y el extracto metanólico de papaya contra Staphylococcus aureus. Sin embargo, la actividad antomicrobiana contra Escherichia coli puede ser potenciada por su interacción aditiva(AU)

Actividad antibacteriana in vitro de aceites esenciales frente a microorganismos implicados en el acné / In vitro antibacterial activity of the essential oil against microorganisms involved in acne

Objetivo: evaluar la composición química, la sensibilidad antibacteriana y la concentración mínima inhibitoria in vitro de tres aceites esenciales de las especies vegetales Origanum vulgare L, Origanum vulgare ssp y Lippia alba Mill cultivadas en el norte del departamento de Bolívar (Colombia), obtenidos mediante hidrodestilación e hidrodestilación asistida por la radiación con microondas. Métodos: los aceites esenciales se obtuvieron por hidrodestilación e hidrodestilación asistida por radiación con microondas, a partir de las hojas; se determinó densidad relativa a 20 °C, índice de refracción, solubilidad de los aceites esenciales en etanol (70 por ciento v/v) y rotación óptica. La composición química se evaluó mediante cromatografía de gases/espectrómetro de masa (CG/EM). La actividad se realizó sobre tres bacterias implicadas en el desarrollo del acné: Propionibacterium acnes ATCC 11827, Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. Para determinar la sensibilidad antibacteriana y la concentración mínima inhibitoria, los aceites se diluyeron hasta la concentración deseada (1 000‒50 µg/mL) empleando el método de microdilución en caldo, y se empleó el lector de microplacas para la cuantificación del crecimiento bacteriano. Resultados: los rendimientos oscilaron entre 0,04 y 0,16 por ciento, dependiendo de la especie vegetal y el método de extracción utilizado. Los resultados de la prueba de sensibilidad mostraron que las bacterias fueron más sensibles al aceite esencial de orégano borde blanco (Origanum vulgare ssp) obtenido mediante ambos métodos de extracción; además, este aceite presentó el mayor contenido de monoterpenos oxigenados con reconocida actividad antibacteriana, como son el carvacrol y el timol. Conclusiones: el aceite esencial de orégano borde blanco (Origanum vulgare ssp) es considerado como promisorio para el control del componente bacteriano del acné vulgar(AU)

Objective: to assess the chemical composition, antibacterial sensitivity and the in vitro minimum inhibitory concentration of essential oils from plant species Origanum vulgare L, Origanum vulgare ssp y Lippia alba Mill cultured in the North of the Department of Bolívar (Colombia), obtained by hydrodistillation and by microwave radiation-assisted hydrodistillation. Methods: essential oils were extracted by distillation and microwave radiation-assisted hydrodistillation from the leaves; relative density at 20 °C, refractive index; solubility of the essential oils in ethanol (70 percent v/v) and optical rotation were all determined. The chemical composition was assessed using gas chromatography/ mass spectrometer The event was perfomed over three bacteria involved in the development of acne: Propionibacterium acnes ATCC 11827, Staphylococcus aureus ATCC 25923 y Staphylococcus epidermidis ATCC 12228. For the purpose of determining the antibacterial sensitivity and the minimum inhibitory concentration, oils were diluted up to reaching the desired concentration (1000-50 µg/mL) using broth microdilution method, and microplate reader for the quantification of bacterial growth. Results: Yields ranged from 0,04 to 0,16 percent, depending on the plant species and the extraction method used. The sensitivity test results showed that the bacteria were more sensitive to the essential oil oregano white border (Origanum vulgare ssp) obtained by both methods of extraction; in addition, this oil showed the greatest content of oxygenated monoterpenes, with known antibacterial activity, such as carvacrol and thymol. Conclusions: the essential oil of oregano white border (Origanum vulgare ssp) is considered as promising for the control of the bacterial component of acne vulgaris(AU)

ANTIFUNGAL ACTIVITY OF NEEM (Azadirachta indica: MELIACEAE) EXTRACTS AGAINST DERMATOPHYTES / Actividad antifúngica de extractos de neem (Azadirachta indica: Meliaceae) sobre hongos dermatofitos

In order to assess the antifungal activity of methanolic extracts from neem tree (Azadirachta indica A. Juss.), several bioassays were conducted following M38-A2 broth microdilution method on 14 isolates of the dermatophytes Trichophytonmentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis and Epidermophyton floccosum. Neem extracts were obtained through methanol-hexane partitioning of mature green leaves and seed oil. Furthermore, high performance liquid chromatography (HPLC) analyses were carried out to relate the chemical profile with their content of terpenoids, ofwidely known antifungal activity. The antimycotic Terbinafine served as a positive control. Results showed that there was total growth inhibition of the dermatophytes isolates at minimal inhibitory concentrations (MIC) between 50 μg/mL and 200 μg/mL for leaves extract, and between 625 μg/mL and 2500 μg/mL for seed oil extract. The MIC of positive control (Terbinafine) ranged between 0.0019 μg/mL and 0.0313 μg/mL. Both neem leaves and seed oil methanol extracts exhibited different chromatographic profiles by HPLC, which could explain the differences observed in their antifungal activity. This analysis revealed the possible presence of terpenoids in both extracts, which are known to have biological activity. The results of this research are a new report on the therapeutic potential of neem to the control of dermatophytosis.

Se determinó la actividad antifúngica de extractos metanólicos de la especie Azadirachta indica A. Juss. (Meliaceae), conocida comúnmente como neem, empleando el método de microdilución en caldo M38-A2 de referencia para hongos filamentosos y dermatofitos. Se evaluaron 14 aislamientos de los dermatofitos Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum, Microsporum canis y Epidermophyton floccosum. Los extractos de neem fueron obtenidos mediante partición metanol-hexano a partir de aceite de semillas y hojas verdes maduras. Adicionalmente, se analizaron por cromatografía líquida de alta resolución (CLAR) con el fin de relacionar su perfil químico con el contenido de terpenoides, de conocida actividad antifúngica. Se empleó como control positivo el antimicótico Terbinafina. Los resultados mostraron inhibición total del crecimiento de los aislamientos de dermatofitos a concentraciones mínimas inhibitorias (CMI) entre 50 μg/mL y 200 μg/mL para el extracto de hojas y entre 625 μg/mL y 2500 μg/mL para el extracto de aceite de semillas. La CMI encontrada para el control positivo (Terbinafina) fluctuó entre 0,0078 μg/mL y 0,0313 μg/mL. Los extractos metanólicos de hojas y aceite de semillas de neem exhibieron diferentes perfiles cromatográficos en CLAR, lo cual podría explicar las diferencias observadas en su actividad antifúngica. Éste análisis químico reveló la posible presencia de compuestos terpenoides en ambos extractos, los cuales se conocen por su actividad biológica. Los resultados de esta investigación son un nuevo aporte sobre el potencial terapéutico del neem para el control de dermatofitosis.

Obtaining the essential oil of Syzygium aromaticum, identification of eugenol and its effect on Streptococcus mutans / Obtención del aceite esencial de Syzygium aromaticum, identificación del eugenol y su efecto sobre Streptococus mutans

Dental caries is a disease which affects the human oral cavity. Currently, the search for active principles of plants with antimicrobial effect seems promising for dental therapy. In this article the activity of the essential oil of Syzygium aromaticum (clove) was evaluated with an emphasis on its antimicrobial properties. The oil was obtained by hydrodistillation, characterized by thin layer chromatography and chemical tests. The main compound was identified in the oil obtained from the flower buds and its antibacterial activity against plank¬tonic cells Streptcoccus mutans ATCC700611 was assessed by performing serial dilutions, from 15 up to 1000 ug/mL, compared with 0.12 percent chlorhexidine and dimethylsulfoxide. MIC was also determined. Subsequently, UFC was analyzed and compared with CMR Test Ivoclar Vivadent. The efficiency in obtaining the oil was 2.20 percent. By using the CCD technique, a fraction was revealed by UV light, corresponding to eugenol. It had a good response for triterpenoids and flavonoids. It showed greater antimicrobial activity at concentrations of 1000, 500 and 250ug/ ml. The MIC and MBC of the oil was 125 to 250ug/mL, respectively. Eugenol was found as an active principle in the oil obtained. Currently, the impact of using plant extracts has favored the evaluation of alternative, effective and biocompatible antibacterial agents for the formulations of oral hygiene products applied to the prevention or treatment of oral diseases.

La caries dental es una enfermedad que afecta la cavidad oral en los humanos. Actualmente la búsqueda de principios activos de plantas con efecto antimicrobiano representa una promesa en la terapia Odontológica. El presente trabajo, evaluó la actividad, del aceite esencial de Syzygium aromaticum (clavo) con énfasis en su propiedad antimicrobiana. El aceite fue obtenido por hidrodestilación, caracterizado por cromatografía en capa delgada y pruebas químicas. Se iden¬tificó el compuesto principal en el aceite obtenido de los botones florales y se evaluó su actividad antibacteriana contra células plantónicas de Streptcoccus mutans ATCC (700611) realizándose diluciones seriadas; desde 15 hasta 1000ug/mL, comparándose con clorhexidina al 0.12 por ciento y dimetilsulfóxido, además se determinó la CMI. Posteriormente, se analizó las UFC, comparándose con el Test CMR® Ivoclar Vivadent. La eficiencia en la obtención del aceite fue de 2.20 por ciento. Por la técnica de CCD se identificó una fracción al revelado UV, corres¬pondiente al eugenol. Presentó respuesta positiva para flavonoides y triterpenos. Mostró mayor actividad antimicrobiana a las concentraciones de 1000, 500 y 250 ug/mL. La CMI y CMB del aceite, resultó a 125 y 250 ug/mL respectivamente. Se comprobó la presencia del eugenol como principio activo en el aceite obtenido. Actualmente la proyección del uso de extractos de plantas ha favorecido la evaluación de agentes antibacterianos alternos, eficaces y biocompatibles para su empleo en las formulaciones de productos de higiene bucal aplicados a la prevención o tratamiento de enfermedades orales.

Actividad antifúngica de extractos de biomasa celular de neem sobre aislamientos de dermatofitos / Antifungal activity of neem cellular biomass extracts on dermatophytes isolates

Las líneas celulares de neem (Azadirachta indica A. Juss.) cultivadas en suspensión líquida han demostrado producir metabolitos secundarios bioactivos, particularmente triterpenoides. En consecuencia, se han realizado estudios para el control de microorganismos de importancia médica, como los hongos dermatofitos. El objetivo principal de este trabajo fue evaluar a través de un método de referencia in vitro la actividad antifúngica de diferentes extractos de cultivos celulares de neem sobre varios aislamientos de Trichophyton mentagrophytes, Trichophyton rubrum y Epidermophyton floccosum. Se realizó un escalado de cultivos de suspensiones celulares de neem, a partir de los cuales se obtuvo un extracto crudo metanólico. Éste extracto fue fraccionado posteriormente por cromatografía en columna de silica gel. Con los extractos obtenidos se determinó la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI), siguiendo el método de microdilución en caldo M38-2, con cinco aislamientos de T. mentagrophytes, cinco de T. rubrum y tres de E. floccosum. Se usó como control positivo el antimicótico Terbinafina. Los resultados mostraron que el extracto crudo de biomasa celular de neem inhibe el crecimiento hasta en 100 % de T. mentagrophytes, T. rubrum y E. floccosum. Al evaluar las fracciones por separado, se observó que las de menor polaridad exhibieron en general mayor actividad antifúngica (CMI=109 μg/mL) que el extracto crudo per se (CMI=2500 μg/ mL) y las fracciones más polares (CMI=7000 μg/mL). Lo anterior indica que las células de neem cultivadas en suspensión producen compuestos con actividad antifúngica, siendo más bioactivos los presentes en las fracciones de menor polaridad.

Cell lines of neem (Azadirachta indica A. Juss.) grown in liquid suspension have shown to produce bioactive secondary metabolites, particularly triterpenoids. In consequence, its use as a control of medical microorganisms (like dermatophytes) is proposed. The main goal of this study was to assess the antifungal activity of methanolic extracts from neem cultured cell suspensions on several isolates of Trichophyton mentagrophytes (five isolates), Trichophyton rubrum (five isolates) and Epidermophyton floccosum (three isolates). Neem cell suspension cultures were scaled up, from which a raw methanolic extract was obtained. This extract was fractionated by silica gel column chromatography. The raw methanolic extract and its fractions were used in order to determine the Minimal Inhibitory Concentration (MIC) on the dermatophytes isolates by following M38-A2 broth microdilution method. Antimycotic Terbinafine was used as positive control. The results shown that neem raw cellular biomass extract inhibits the growth of T. mentagrophytes, T. rubrum and E. floccosum in at least 100%. In the evaluations of the separated fractions, it was observed that the low polarity fractions had higher antifungal activity (MIC=109 μg/mL) than the raw extract per se (MIC=2500 μg/mL) and the most polar ones (MIC=7000 μg/mL). The latter suggest that neem cells cultured in liquid suspension produces compounds with antifungal activity, being more active those present in the low polarity fractions.

Establecer puntos de cortes epidemiológicos de la actividad in vitro de azoles frente a los aislados de candida spp por el método de etest y microdilución en caldo / Establish epidemiological cut-off points for the in vitro activity of azoles against candida spp. isolates, by the etest method and broth microdilution

Durante las últimas décadas, el aumento de la prevalencia de las infecciones fúngicas ha sido constante, convirtiéndose en uno de los retos sanitarios actuales dado el incremento de morbimortalidad y de los costos asociados a Infecciones por Candida; la tasa de mortalidad es del 47% marcado por el cambio epidemiológico de las especies de Candida diferentes de C. albicans; las cuales presentan resistencia a los antifúngicos; por lo que es necesario establecer puntos de corte epidemiológico que permitan la indicación del antifúngico adecuado y precoz para minimizar resistencia y morbi-mortalidad. Se analizaron 102 aislados, la especie más frecuente fue Candida pelliculosa (43%), seguida por C. parapsilosis (34%), C. tropicalis (9%), C. albicans (6%), C. lipolytica (4%) y con un 2% correspondiente para C. guilliermondii y C. glabrata. Los valores obtenidos por microdilución en caldo y difusión por Etest, como punto de corte epidemiológico (PCE en µg/mL) fueron en fluconazol, voriconazol y posaconazol 4, 0,25 y 1 respectivamente para C. pelliculosa; 2, 0,06 y 0,125 para C. parapsilosis; 2, 0,25 y 0,125 corresponde a C. tropicalis; 2 , 0,125 y 0,25 para C.albicans. A C. lipolytica, C. guillermondii y C. glabrata la cantidad de aislados no eran representativo para determinar el PCE. Se encontró una resistencia de 9,8%, a los triazoles. Ambos métodos presentaron una correlación de 0.99 se recomienda el uso de Etest para determinar la Concentración Mínima Inhibitoria en el Laboratorio de Microbiología y detectar resistencia de forma precoz.

During the last decades, there has been a constant increase of the prevalence of fungal infections, becoming one of the actual sanitary challenges given the increase of death rates and costs associated to infections caused by Candida., the mortality is 47% marked by the epidemiological change of the different from the C. albicans species of Candida., which present resistence to fungus treatments, that is why it is necessary to state epidemiological cuts that allow the indication of the proper antifungus treatment at an early moment to minimize resistance and high death rate., 102 strains were analyzed., the most common species was Candida pelliculosa (43%), followed by C. parapsilosis(34%), C tropicalis(9%), C albicans (6%), C. lipolityca (4%), and a 2% corresponds to C. guillermondii and C . glabrata. The values obtained by microdilution in broth and Etest diffusion as an epidemiological cutoff values (EVC in µg/ml) were in fluconazole, voriconazol and posaconazole 4, 0.25 and 1 respectively for C. pelliculosa., 2, 0.06 and 0.125., C parapsilosis; 2, 0.25 and 0.125., it corresponds to C. tropicalis; 2, 0.125 and 0.25 for C albicans, C lipolityca, C. guillermondii and C. glabrata the amount of isolates was not reprentative enough to determine the ECV. A resistante of 9.8% was found. Both methods presented a correlation of 0.99 and the Etest is recomended to determine the minimum inhibitory concentration in laboratory to detect resistance earlier

Validación del agar Mueller Hinton modificado para la determinación de las concentraciones mínimas inhibitorias a los antifúngicos por etest en candida spp / Validation of the modified Mueller Hinton agar for the determination of the minimum inhibitory concentrations to antifungals by E-test in Candida spp

En este trabajo de investigación se determinaron las Concentraciones Mínimas Inhibitorias (CMI) de los antifúngicos fluconazol, voriconazol, posaconazol, caspofungina, anidulafungina y anfotericina B, por los métodos de microdilución en caldo y difusión en agar con Etest, empleando RPMI 1640 agar y Mueller Hinton modificado (MHm), en 102 cepas de Candida spp., aisladas de sangre, provenientes de la Red de Candidemia del INHRR. El objetivo fue validar el empleo del MHm como medio de cultivo confiable en el método de Etest para la obtención de las CMI. Se utilizaron las cepas C. parapsilosis ATCC 22019 y C. krusei ATCC 6258 como control de calidad. Los resultados demostraron un 94% de frecuencia para C. no albicans y un 6% para C. albicans. Se obtuvo un 100% de sensibilidad para las equinocandinas y anfotericina B, en todas las especies. El MHm demostró una elevada reproducibilidad con respecto al RPMI agar y el método de referencia microdilución en caldo. En base a los resultados obtenidos en esta investigación, se logró la validación del medio MHm para la determinación de las CMI por Etest, así como la detección de resistencia, recomendándolo como metodología confiable, accesible y de fácil ejecución para uso rutinario en el laboratorio de microbiología.

In this research, the Minimum Inhibitory Concentrations (MICs) of the antifungal agent's fluconazole, voriconazole, posaconazole, caspofungin, anidulafungin and amphotericin B were determined by broth microdilution and agar diffusion Etest methods, using RPMI 1640 agar and modified Mueller Hinton (mHM), in 102 strains of Candida spp., isolated from blood, from the Candidemia Network of the INHRR. The objective was to validate the use of mHM as a reliable culture medium for the Etest method to obtain MICs. As a quality control, the strains C. parapsilosis ATCC 22019 and C. krusei ATCC 6258 were used. The results demonstrated a 94% of frequency for non C. albicans and 6% for C. albicans. A 100% of sensitivity was obtained for echinocandins and amphotericin B in all species. The mHM showed high reproducibility with respect to RPMI agar and the reference method of microdilution broth. Based on the results obtained in this investigation, the validation of mHM medium, for the determination of MICs by Etest, as well as the resistance detection was achieved, recommending it as a reliable, affordable and easy to implement method for the routine use in the microbiology laboratory.

Comparación de concentración mínima inhibitoria y concentración plasmática de cefalotina mediante un modelo matemático / Comparison of the minimal inhibitory concentration and the plasma cephalotin concentration through a mathematical model

Introducción: el uso de fármacos fuera de rangos terapéuticos es un problema hospitalario, pues pocas veces se tienen en cuenta parámetros antropométricos del paciente, determinantes en las concentraciones del medicamento. Objetivo: aplicar un modelo matemático basado en parámetros del paciente, para determinar las posibles concentraciones plasmáticas de cefalotina y compárarlas con las concentraciones mínimas inhibitorias de los microrganismos aislados. Métodos: se seleccionó un grupo de pacientes del sexo masculino entre 18 y 50 años de edad con tratamiento profiláctico posquirúrgico con cefalotina. Se recopiló la información: dosis de cefalotina, peso, talla, edad, hematócrito. Se calcularon volumen extracelular, plasmático y sanguíneo según el modelo informado por Hedin. Luego se calculó la concentración plasmática de cefalotina usando el modelo propuesto en el presente estudio y se comparó con la concentración mínima inhibitoria de los microorganismos aislados. Resultados: se analizaron 24 pacientes con promedio de edad 32,6 años ± 8, peso de 69 kg ± 7,51, talla de 168,87 cm ± 7,10. El 56,3 por ciento de los microorganismos presentó resistencia a concentraciones ³ 32 µg/mL. El agente más común fue Escherichia coli de 18 cepas aisladas. La comparación del volumen de distribución y la concentración plasmática de cefalotina calculada con el modelo informado por Hedin y el desarrollado en presente trabajo, no presentó diferencia significativa después de aplicar la prueba t de Student, con p< 0,05. Conclusiones: al comparar las concentraciones teóricas de cefalotina para uso profiláctico posquirúrgico intrahospitalario, calculadas con el modelo planteado, se encontró que estas no permitieron superar la concentración mínima inhibitoria de los microorganismos aislados(AU)

Introduction: the use of drugs out of therapeutic ranges is a hospital problem since the anthropometric parameters of patients, which are determinants in the drug concentrations, are rarely taken into consideration. Objectives: to implement a mathematical model based on the patient's parameters in order to determine the possible plasma cephalotine concentrations and to compare them with the minimum inhibitory concentrations for isolated microorganisms. Methods: a group of male patients aged 18 to 50 years under postsurgical prophylactic treatment with cephalotine was selected. Data was collected on cephalotin dosage, weight, size, age and hematocrit. Extracellular, plasma and blood volumes were estimated by the Hedin's informed model. Additionally, the plasma cephalotin concentration was measured by using the model suggested in this study and then compared with the minimum inhibitory concentration for the isolated microorganisms. Results: twenty four patients aged 32.6 years ± 8, weighing 69 kg ± 7.51, with size of 168.87 cm ± 7.10 were analyzed. Resistance to concentrations equal to or higher than 32 µg/mL was observed in 56.3 percent of microorganisms. The most common agent was Escherichia coli in 18 isolated strains. The comparison of the distribution volume and of the plasma cephalotin concentration estimated with the Hedin's informed model and with the model devised in the present paper did not show significant differences according to Student's t test result, with p< 0.05. Conclusions: the comparison of the theoretical concentrations of cephalotine for in-hospital postsurgical prophylactic use estimated by the model yielded that these concentrations did not allow overcoming the minimum inhibitory concentration for the isolated microorganisms(AU)

Efecto bacteriostático y/o bactericida del xilitol sobre cultivos de Listeria monocytogenes / Bacteriostatic effect and/or xylitol bactericide of crops on Listeria Monocytogenes

Listeria monocytogenes ha sido considerado como un patógeno emergente causante de enfermedades alimentarias. En la búsqueda de una vía alterna biocontroladora de su propagación, se propone al xilitol como posible agente bacteriostático y/o bactericida. El xilitol es un poliol derivado de la hidrogenación del monosacárido xilosa de relevancia en la industria farmacéutica por su efecto anticariogénico. Para comprobar el efecto del xilitol como posible agente bacteriostático y/o bactericida sobre Listeria monocytogenes, se determinó la concentración mínima inhibitoria (CMI), el tiempo mínimo de inhibición (TMI) y la concentración bactericida mínima (CBM) de soluciones de xilitol en cultivos de Listeria monocytogenes ATCC 7635. Se aplicó el método de difusión en agar, utilizando soluciones de xilitol en concentraciones de 0 a 10%, respectivamente, para la CMI. El TMI se determinó por curvas de crecimiento en caldo Soya tripticasa con soluciones de 1, 2, 3, 5, 8, 9, 10 y 20% de xilitol, respectivamente, con un inoculo inicial de 108 UFC de Listeria monocytogenes por mL en cada solución. Se observó que la CMI fue con la solución del 1% de xilitol; el TMI fue de 10 horas con las concentraciones de 1 a 10% y de 7 horas al aplicar 20% xilitol. Se comprobó que efectivamente el xilitol tiene poder bacteriostático sobre Listeria monocytogenes (p<0.001), más sin embargo, no se obtuvo efecto bactericida en los ensayos realizados.

Listeria monocytogenes has been considered as an emerging pathogen causing foodborne illness. In the search for an alternate route biocontrol propagation, xylitol has been proposed as a possible bacteriostatic and / or bactericide. Xylitol is a polyol derived from the hydrogenation of xylose monosaccharide of importance in the pharmaceutical industry for its anti-cariogenic effect. To check the possible effect of xylitol as bacteriostatic and /or bactericidal against Listeria monocytogenes, it was determined the minimum inhibitory concentration (MIC), the time minimum inhibition (TMI) and minimum bactericidal concentration (MBC) of xylitol solutions on Listeria monocytogenes ATCC 7635. The agar diffusion method was applied, using xylitol solutions at concentrations of 0-10%, respectively, for the MIC. The TMI was determined by growth curves in trypticase soy broth with solutions 1, 2, 3, 5, 8, 9, 10 and 20% of xylitol, respectively, with an initial inoculum of 108 CFU per ml of Listeria monocytogenes in each solution. MIC observed was the solution 1% of xylitol; the TMI was 10 hours to concentrations of 1 to 10% and 7 hours to apply 20% xylitol. It was found that xylitol has bacteriostatic power on Listeria monocytogenes (p <0.001), but not bactericide effect.

Actividad Antibacteriana in vitro de extractos y fracciones de Physalis peruviana L. y Caesalpinia pulcherrima (L.) Swartz / In vitro antibacterial activity of extracts and fractions of Physalis peruviana L. and Caesalpinia pulcherrima (L.) Swartz

We evaluated the in vitro antibacterial activity of extracts and fractions of Physalis peruviana L. calyces and flowers and leaves of Caesalpinia pulcherrima (L.) Swartz against ATCC strains Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae and Pseudomonas aeruginosa, determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). We find potent activity with MIC < 0,256 mg/mL for the chloroform fraction of P. peruviana calyces, the ethanol fraction of flowers of C. pulcherrima and ethanol and ether fractions of leaves of C. pulcherrima. Based on these results, we conclude that both species are promising and it is recommended to continue exploring them in order to isolate, purify and to elucidate the chemical structure from those compounds responsible for the biological activity of each active fraction.

Se evaluó la actividad antibacteriana in vitro de extractos y fracciones de los cálices de Physalis peruviana L. y flores y hojas de Caesalpinia pulcherrima (L.) Swartz frente a cepas ATCC de Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumoniae y Pseudomonas aeruginosa, determinando la concentración mínima inhibitoria (CMI) y la concentración mínima bactericida (CMB). Encontramos potente actividad, con valores de CMI < 0,256 mg/mL para la fracción en cloroformo de los cálices de P. peruviana, la fracción en etanol de las flores de C. pulcherrima y las fracciones en etanol y éter de las hojas de C. pulcherrima. En función de los resultados obtenidos, concluimos que ambas especies son promisorias y se recomienda continuar su estudio intentando aislar, purificar y dilucidar la estructura química de los compuestos responsables de la actividad biológica en cada fracción activa.

Actividad antifúngica in vitro y concentración mínima inhibitoria mediante microdilución de ocho plantas medicinales / In vitro antifungal activity and minimum inhibitory concentration by microdilution of eight medicinal plants

Se determinó la actividad antifúngica in vitro de los extractos metanólicos, etanólicos e hidroalcohólicos de Hypericum laricifolium (partes aéreas), Ilex guayusa Loes (hojas), Juglans neotropica Diels (corteza), Piper lineatum (hojas), Piper spp. (hojas), Psidium guajava (hojas), Cassia reticulata Wild (planta entera) y Terminalia catappa (hojas); recolectadas en los departamentos de Amazonas y Cajamarca. La actividad antifúngica se evaluó mediante el método de difusión en agar frente a Candida albicans ATCC 10231, Aspergillus niger ATCC 16404 y Microsporum canis cepa clínica y la Concentración Mínima Inhibitoria (CMI) por el método de microdilución colorimétrico, utilizando como controles ketoconazol y fluconazol. Todos los extractos presentaron actividad antifúngica importante frente a C. albicans y M. canis, y ninguno tuvo actividad frente a A. niger. Las condiciones de laboratorio para determinar la concentración mínima inhibitoria (CMI) de C. albicans mediante el método de microdilución colorimétrico fueron: temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 24 h, inóculo final 0,5-2,5 x 103 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo; y, para M. canis fueron temperatura de incubación de 37°C, tiempo de incubación de 4 días, inóculo final de 1,2 ­ 6 x 104 ufc/mL y 0,05 mg de resazurina por pozo. Mediante microdilución se determinó que 19 (79%), 18 (75%) y 24 (100 %) de los extractos investigados presentaron CMIs ≤ 1000 µg/mL, frente a Candida albicans ATCC 10231, Candida albicans cepa clínica y Microsporum canis, respectivamente. Los extractos con la mayor actividad antifúngica fueron los de Juglans neotropica Diels, Psidium guajava y Terminalia catappa; con CMIs < 100 µg/mL. El método de microdilución colorimétrico usando resazurina demostró ser útil para el screening antifúngico de extractos de plantas.